NEFA Assay Kit は、NEFA を定量化するためのツールです。

NEFA アッセイキット NEFA (一酸化窒素) を定量化するためのツールです。血液または組織サンプル中の NEFA の濃度を測定するために使用されます。 NEFA は、エネルギー代謝、心臓の興奮性、神経筋伝導、血圧、血液凝固の調節に関与する重要な栄養素です。主に骨、筋肉、軟組織、赤血球に存在します。

準備

NEFA は、DNA に結合する能力のある 50.2 kDa の小さなタンパク質です。これは、非エステル化パルミチン酸を生成するサイトゾルの I 型脂肪酸シンターゼ (FAS) 複合体です。アシル-CoA オキシダーゼ (ACS) の存在下で、FAS 複合体は 3-メチル-N-エチル-N-(b-ヒドロキシエチル)-アニリンを、アセチル-CoA の分子前駆体である 4-アミノアンチピリンに酸化します。このプロセスは、すべての真核生物にとって重要な酵素プロセスです。

NEFA は脂肪ほど大きな質量を持っていないかもしれませんが、末梢組織にとって重要な燃料源です。それは肝臓によって代謝され、アルブミンと複合体を形成して末梢組織に輸送されます。 NEFA は、FAS 複合体のチオエステラーゼ (TE) ドメインによっても放出されます。

ピペッティング

ELISA キットは、小さな化合物、タンパク質、ペプチドの検出に使用されます。これらのキットは、大腸菌で発現された組換えタンパク質に基づいています。キットにはアジド、チメロサール、その他の天然資源は含まれていません。

キットには、BSA、パイロジェンフリーの希釈バッファー、洗浄液などの試薬が含まれています。洗浄液は 2 ～ 8℃で 2 週間安定です。希釈バッファーには 0.9% 生理食塩水が含まれています。

キットには内部 NEFA 標準が含まれています。これに、サンプル中の予想濃度と一致する濃度の NEFA を添加します。 546nmにおける青紫色素の吸光度を測定し、サンプル中のNEFA濃度を計算します。

比色分析

WAKO NEFA キットを使用すると、無意味な結果も含め、さまざまな結果が得られました。それにもかかわらず、動物組織サンプルの相対的な脂肪酸含有量を測定する場合、NEFA キットは有力な候補です。そのため、NEFA キットは最も人気のある臨床検査の 1 つです。このキットには、血液、血清、唾液、さまざまな脂質など、さまざまな種類のサンプルを検査するための説明書が付属しています。

このキットの最も興味深い点は、脂質に一般的に含まれる脂肪酸を含むさまざまな脂肪酸の測定に使用できることです。このキットには、人間や動物に含まれる C-8 脂肪酸や C-16 脂肪酸など、さまざまな脂肪酸を検出するように設計された一連の酵素が付属しています。それにもかかわらず、このキットは広範囲にわたる高精度 FFA 濃度での使用には推奨されません。

電気化学

NEFA は人間の健康にとって重要な脂肪酸ですが、評価されることはほとんどありません。さらに、それらの検出には非常に費用がかかります。したがって、それらの濃度の変化を監視することは、より正確な病気の予防と管理に役立ちます。この研究では、センサー表面として PDA-MWCNT を使用して、NEFA 用の電気化学アッセイ キットを開発しました。この電極は、NEFA 酸化ステップに対して良好な電極触媒活性を示し、実際の用途に使用できる可能性があります。

酵素電極は、PDA-MWCNT、ACOD、ACS、ポリマーの多層複合膜で構成されています。層の順序は、酵素反応の順序と一致するように選択されました。 ACS および ACOD はフィルム内で生物学的に活性を維持していることが確認されました。

T2D における NEFA 濃度

血中のNEFA濃度は、肥満と高血圧に関連して研究されています。これらの化合物は、α1 アドレナリン刺激を通じて血圧上昇を促進し、酸化ストレスを増加させることが示されています。 NEFA はメタボリックシンドロームとも関連しています。これらの化合物は高血圧の発症に重要である可能性があります。

静脈内グルコース負荷に対する血漿 NEFA 応答を説明するために、いくつかのモデルが提案されています。ボストン モデルは、NEFA 濃度増加の第 4 段階を正確に描写しました。ただし、このモデルでは初期の潜伏期間については説明されていませんでした。フェビアン モデルでは、この段階を記述するために単純な指数関数的な傾きを採用しました。同様に、トーマス モデルはリバウンド段階を記述することができませんでした。

中性脂肪中のNEFAレベル

いくつかの研究で、血漿 NEFA 組成に対する肥満手術の影響が調査されています。 2016年に発表されたメタアナリシスでは、血清NEFAレベルは手術後6か月と12か月で減少した。これはインスリンレベルの低下が原因である可能性があります。別の研究では、ルーアンワイ胃バイパス手術の前後に肥満患者のグループで血漿NEFAが測定されました。

7 つの NEFA の濃度は、手術後 9 か月で減少しました。リノール酸 (オメガ 6 脂肪酸) は 18:2、ステアリン酸は 18:0、オレイン酸は 16:0 に減少しました。ただし、ドコサヘキサエン酸の濃度は影響を受けませんでした。 NEFA は脂肪酸メチルエステル (FAME) に変換されました。次に、これらをガスクロマトグラフィー質量分析 (GC-MS) で分析しました。